1. 凝胶色谱法，ir高温凝胶渗透色谱仪原理？
GPC凝胶渗透色谱的原理: GPC的分离是利用体积排除机理，装填的是多孔性凝胶或微粒，孔径大小与待分离的聚合物分子相似，体积大的高分子化合物不能进入凝胶孔，最先从凝胶粒间流出，淋出体积（时间）最小，高聚物依分子量从大到小依次淋出。
这样，通过做已知分子量的高分子聚合物的标准曲线，就能分析同系未知待测高分子化合物了。
2. 凝胶色谱法透析的目的？
凝胶色谱不但可以用于分离测定高聚物的相对分子质量和相对分子质量分布，同时根据所用凝胶填料不同，可分离脂溶性和水溶性物质，分离相对分子质量的范围从几百万到100以下。近年来，凝胶色谱也广泛用于小分子化合物。相对分子质量相近而化学结构不同的物质，不可能通过凝胶渗透色谱法达到完全分离纯化的目的。
凝胶色谱不能分辨分子大小相近的化合物，相对分子质量相差需在10%以上才能得到分离。
3. 具有生物活性的生物大分子用哪种色谱法测定？
生物大分子色谱纯化方法的选择思路通常在做纯化前对自己的目标物质特性了解越多对纯化将会越有利，如果不太了解，也可以通过电泳知道目标物质和杂质的情况，找到一种简单的鉴定方法，此外在纯化前必须先建立可靠的活性测定的方法。
如果是未知的蛋白，那么通常可以有几种简单的摸索：
1. 凝胶过滤色谱。
这个方法很常用，但是效率不高，对低浓度的样品没有富集作用，上样量小。
2. 离子交换色谱。
此法很常用，但是样品必须没有高浓度的盐。
3. 疏水色谱��
4. 凝胶色谱的适用范围怎么确定？
凝胶渗透色谱（Gel Permeation Chromatography、GPC）是1964年，由J.C.Moore首先研究成功。不仅可用于小分子物质的分离和鉴定，而且可以用来分析化学性质相同分子体积不同的高分子同系物（聚合物在分离柱上按分子流体力学体积大小被分离开）
5. 凝胶渗透色素法的基本操作方法？
1.溶剂的选择
能溶解多种聚合物;不能腐蚀仪器部件;与检测器相匹配。
2.把激光光散射与凝胶色谱仪联用
在得到浓度谱图的同时，还可得到散射光强对淋出体积的谱图，从而计算出分子量分布曲线和整个试样的各种平均分子量。
3.样本的准备
激光光散射实验中必须对样品严格除尘。溶液除尘是光散射成败的关键。首先是溶剂除尘，配置测试样品的溶剂应进行精馏，并经过0.2μm超滤膜过滤后方可使用。配好的溶液也要用0.2μm的超滤膜过滤。另外，测试中所用的器械，如：注射器等，使用前要用洗液浸泡，清水强力冲洗。
4.GPC色谱柱选择
(1)按照样品所溶解的溶剂来选择柱子所属系列
THF、LV仿、DMF
必须选择合适的溶剂来溶解聚合物
(2)按照样品分子量范围来选择柱子型号
样品分子量应该处在排阻极限和渗透极限范围内，并且应该处在校正曲线线性范围内
5.GPC 仪器对载体的要求
(1)良好的化学稳定性和热稳定性;
(2)有一定的机械强度
(3)不易变形;
(4)流动阻力小
(5)对试样没有吸附作用
(6)分离范围越大越好(取决于孔径分布)等
(7)载体的粒度愈小，愈均匀，堆积的愈紧密，色谱柱分离效率愈高。
6.进样体积
50-100uL之间(浓度在0.05%-0.5%之间)
7.GPC系统如何平衡
(1)安装色谱柱之前，用两通管连接管路，用流动相替换系统后换上GPC柱子。(注意溶剂互溶情况)
(2)RID平衡操作
分析开始前，用流动相冲洗检测器流路。
流动相流速1ml/min，切换到R Flow，使流动相通过检测池的样品池和参比池，冲洗20min左右。
然后切换R Flow 流路数次，将气泡赶出检测池。
关闭R Flow，等待基线平稳。
当Balance 值高于50，进行Balance 调整。
(3)色谱柱平衡
等溶剂峰出峰后在经过约一次分析时间后基线才能走平。
6. 分离蛋白质的方法高中？
高中化学中，分离蛋白质的方法主要有以下几种：
1. 盐析法：在蛋白质溶液中加入饱和盐溶液，使得蛋白质与盐结合并凝聚成团，然后用离心机离心沉淀，最后用水或缓冲液洗涤沉淀。
2. 溶剂沉淀法：在蛋白质溶液中加入适当的有机溶剂，使得蛋白质凝聚成团并沉淀，然后用离心机离心沉淀，最后用水或缓冲液洗涤沉淀。
3. 凝胶过滤法：通过分子量筛选，将蛋白质分子按照大小从大到小分离出来，大分子蛋白质被滞留在凝胶中，小分子蛋白质则通过凝胶被分离出来。
4. 电泳法：利用蛋白质在电场中的电荷和大小的差异，通过在凝胶中进行电泳实验，将蛋白质分离出来。
这些方法在实验室中都有广泛的应用，在生物医学领域、食品工业和环境保护等领域都有重要的作用。
7. 色谱柱可以变成什么样？
色谱柱可以有不同的形态和材料，常见的色谱柱包括：1. 毛细管色谱柱：通常由玻璃或石英材料制成，内径较小，用于毛细管气相色谱或毛细管液相色谱。2. 包裹型色谱柱：将固定液固定在基质上，在柱内形成固定相。可以是平均颗粒大小一致的包裹型色谱柱（如包裹型液相色谱柱和包裹型气相色谱柱），也可以是不均粒径的放大型包裹型色谱柱（如高效液相色谱柱）。3. 填充型色谱柱：由管壳和填充物组成，填充物通常为固体，如硅胶、分子筛等。填充型色谱柱分为液相色谱柱和气相色谱柱。4. 离子交换色谱柱：采用离子交换树脂作为固定相，用于离子的分离与分析。5. 大孔柱：具有较大孔径的色谱柱，通常用于分析大分子或颗粒物质。此外，还有一些特殊类型的色谱柱，例如：手性色谱柱用于手性化合物分离；凝胶色谱柱用于多肽、蛋白质等大分子的分离和分析等。
